脑血管疾病是世界上严重危害人类健康的三大疾病之一，死亡率高达56.6%—80%。即使存活，也会留下严重的后遗症。其中缺血性脑血管病占多数，大部分由大脑中动脉梗塞引起，简称MCAO。MCAO模型是一种局灶型脑缺血模型，也是目前应用最广泛的脑缺血模型。建立理想的脑缺血动物模型对脑缺血病的发病机理研究及其治疗药物的研究至关重要。

一、动物模型构建：

A、仪器与材料：
异氟烷气体麻醉系统、造模保温手术台，线栓；


 

1. 吸入式麻醉系统安全性高。麻醉效果迅速，2分钟动物进入深度麻醉状态，撤去麻醉面罩后，动物2分钟可清醒。
2. 保温手术台能更好的控制动物体温，维持生理体征提高成活率，配套的耳杆起到定位仪的作用，辅助固定。
3. 目前市场上主要有硅胶和多聚赖氨酸两种材质的线栓。强烈建议大家采用硅胶线栓。因为多聚赖氨酸对血管内皮细胞损伤严重，血小板聚集导致血栓形成，拔线后用多普勒血流仪（Moor Instruments）检测血流，每只动物血流恢复的程度差异增大。其次，也有部分动物模型是非再灌模型。

B、试剂：
碘伏、酒精、、生理盐水、牙科水泥、抗生素、异氟烷

二、手术：


三、造模判定：

1. 动物行为判定

TopScan(CleverSys, Inc., CSI)

该系统可完成水迷宫，Y迷宫，八臂（辐射）迷宫，巴恩斯迷宫，高架十字迷宫，高架O型迷宫，自发活动实验，新物体识别实验，穿梭避暗实验，条件性位置偏爱实验，转圈实验，圆筒实验等各项常规动物行为学实验，还有专门用于恐惧抑郁、社会交互模块的软件。



动物步态分析系统(CleverSys, Inc., CSI)

RunwayScan适用于平板跑道步态分析；TreadScan可以被动的方式促使动物运动；FreewalkScan更接近于自然生理状态下的步态分析；KinemaScan关节步态分析，加入了关节功能分析。



2. 激光多普勒血流血氧系统&激光散斑血流成像系统



Moor激光多普勒血流监测仪在术中实时监测局部脑血流的方法。暴露实验鼠颅骨并将待检部位微微磨薄，用吉安得尔提供的速凝胶水将光纤探头牢固地固定在检测部位。此时已可以从moorVMS-PC软件界面中看到血流曲线和读数。在实施MCAO手术整个过程中，都可以通过moorVMS-PC软件连续地监测梗死区脑血流的变化。

有研究表明MCAO模型成功的大鼠插栓时脑血流降幅距基线达到70%以上，且拔栓后血流迅速恢复接近基线，模型成功为88%。



FLPI激光散斑成像系统具有非接触、高分辨、快速成像等优点，此技术非常适用于血液微循环的测量，监测脑缺血区域的缺血和再灌注过程中的血流，不仅可以为缺血性中风的预防和临床药物治疗提供帮助，并且可以为研究缺血再灌注损伤的机制提供血液动力学方面的证明和启示。

吉安得尔提供的Moor系列激光多普勒及激光散斑血流测量系统，可以准确地评价检测部位的脑血流水平以及变化，方便对实验动物进行术中脑血流连续监测，或进行不同实验条件下脑血流对比检测，是脑缺血模型制备、疗效评价等过程中必不可少的工具。

4、TTC染色病理组织学验证：


MCAO成功模型TTC染色

Publications

The GLP-1 receptor agonists exendin-4 and liraglutide alleviate oxidative stress and cognitive and micturition deficits induced by middle cerebral artery occlusion in diabetic mice Ping-Chia Li,Li-Fen Liu,Ming-Jia Jou and Hao-Kuang Wang Li et al. BMC Neurosci (2016) 17:37
Reduction in local cerebral blood fl ow induced by endothelin-1 applied topically to the middle cerebral artery in the rat.
Robinson M J, Macrae I M, Todd M, Reid J L, McCulloch J. Journal of cardiovascular pharmacology 1991;17 Suppl 7:S354-7.
Progesterone suppresses the infl ammatory response and nitric oxide synthase-2 expression following cerebral ischemia.
Gibson CL, Constantin D, Malcolm J.W. Prior, Philip M.W. Bath, Sean P. Murphy. Experimental Neurology 193 (2005) 522– 530.
Systemic hypoxia and the depression of synaptic transmission in rat hippocampus after carotid artery occlusion. Fowler JC,Gervitz LM, Hamilton ME, Walker JA. J Physiol. 2003 Aug 1;550(Pt 3):961-72. Epub 2003 Jun 13.
Selective MCA occlusion: A precise embolic stroke model. Dinapoli VA, Rosen CL, Nagamine T, Crocco T. J Neurosci Methods.
2006 Jun 30;154(1-2):233-8. Epub 2006 Feb 10.